功能性消化不良成年小鼠模型的制备方法(3)
<0.0 5)。见表1-3。
表1 两组小鼠体质量比较(±s,n=30)Table 1 Comparison of body mass of mice between two groups表注:与造模前体质量比较,aP=0.005;变化率正值代表体质量增长,负值代表体质量下降,与空白对照组比较,bP=0.000组别 造模第1天(g) 造模第8天(g)变化率(%)空白对照组33. 37. 14.模型组33. 29. -11.
表2 两组小鼠小肠推进率及胃内容物排空的比较(±s,n=30,%)Table 2 Comparison of intestinal propulsion rate and gastric表注:与空白对照组比较,aP=0.001组别 推进率 胃内容物排空空白对照组96. 60. 模型组82. 49.
表3 两组小鼠饮水量和饮食量的比较(±s,n=30)Table 3 Comparison of water and food intake between two groups of mice表注:与空白对照组比较,aP=0.001组别 日均饮水量(m L) 日均饮食量(g)空白对照组4. 5.模型组3. 3.
图1 小鼠一般状况Figure 1 General conditions of mice图注:图A 为空白对照组;B为模型组。模型组小鼠出现拱背、竖毛现象,毛色逐渐失去光泽且枯黄色
2.3 形态学结果 见图2。经过光镜观察苏木精-伊红染色切片发现空白对照组十二指肠、小肠组织单层柱状上皮完整、浆液性腺体无明显病理变化,模型组十二指肠、小肠出现轻度损伤表层少量细胞脱落,绒毛不完整。空白对照组的胃组织黏膜层、肌层、浆膜层较为完整,模型组胃黏膜层中淋巴细胞轻微增多,可能存在轻微炎症现象。
图2 两组小鼠十二指肠、小肠和胃组织黏膜变化(苏木精-伊红染色,×200)Figure 2 Changes of mucous membranes in duodenum, small intestine and gastric tissues in two groups of mice (hematoxylin-eosin staining, ×200)图注:模型组十二指肠、小肠出现轻度损伤表层少量细胞脱落,绒毛不完整;胃黏膜层中淋巴细胞轻微增多,可能存在轻微炎症现象
3 讨论Discussion
功能性消化不良是一种临床极为常见的发病机制复杂的消化系统疾病,西医多认为是由于胃动力低下、胃底调节障碍、内脏敏感性增高等原因引起[8-9]。中医则将功能性消化不良出现的病症归属于积滞、痞满泄泻、食少纳呆、嗳气吞酸,究其病理机制属于肝郁脾虚、肝郁气滞等[10-13],除此以外心理精神因素的影响也成为了近些年的研究热点。有研究显示雌性动物更易受抑郁、焦虑等精神因素的影响[14-15]。成年人的组织器官敏感度以及对于外来刺激的应答机制与新生儿有所不同,所以在新生儿期的胃刺激导致的胃运动功能障碍与模拟实际患病时期的身体状况有差异,故制备更符合临床需要的功能性消化不良动物模型并考虑到性别与年龄的影响,课题组此次实验选用的动物都是雌性10周龄的成年小鼠。
为建立一种成年鼠功能性消化不良模型,此次实验在查阅资料后在造模方法上选择采用较为普遍的联合多因素造模方法:碘乙酰胺造模方法联合间日给食的基础上加入左旋精氨酸、大黄水煎液以及强迫游泳。碘乙酰胺是一种烷基化试剂,可导致黏膜受损、细胞缺氧等现象,单独使用碘乙酰胺制备功能性消化不良模型只是通过刺激胃黏膜的途径模拟患者上腹部的灼烧感与嗳气吞酸的症状,并不能通过影响胃肠运动导致腹泻,吕林等[16]就根据经典碘乙酰胺造模法成功复制功能性消化不良模型[17];碘乙酰胺的剂量、小鼠的个体差异以及是否联合用药均会影响造模质量,刘成全等[3]对单独使用碘乙酰胺的模型组、碘乙酰胺加强迫游泳、碘乙酰胺加小平台3种造模方法做了横向比较,证实了单独使用碘乙酰胺组也不如复合因素造模组效果理想。左旋精氨酸可在一氧化氮合酶的作用下生成一氧化氮,一氧化氮可作用与胃,减少胃窦指数但是无法抑制胃排空,而且在禁食期与给食期左旋精氨酸的效果不一[18],因此若单独选用左旋精氨酸作为造模药物稳定性无法保证。大黄中的蒽醌类物质作用于肠平滑肌,通过增加肠蠕动而导致泻下现象[19];在胡洁等[20]学者的研究中使用按1 g/(m L·d)大黄水煎液复制的脾虚证模型,出现了功能性消化不良模型的症状:毛发枯涩、便溏脱肛等;但是刘艳阳[21]在文章中提出,单独使用苦寒泄下法如:番泻叶灌胃、大黄水煎液灌胃复制功能性消化不良模型复制性差、自愈倾向严重[21-22];除此以外大黄具有明显的肝脏及结肠毒性[23-24],此次实验考虑到此种因素降低了大黄的使用量,造模后切片观察此种造模方法成功的同时没有造成大肠黑变病的毒性作用,而且小鼠也没有出现便溏脱肛、久泻不止的现象,故在此种剂量下制备的功能性消化不良模型自愈性低、毒性小更加可靠且贴近现实消化不良情况。
文章来源:《胃肠病学和肝病学杂志》 网址: http://www.wcbxhgbxzz.cn/qikandaodu/2021/0708/541.html